Description

Unit size: 50 cột

Bộ dụng cụ NZY miRNA Isolation & RNA Clean-up được thiết kế để tinh chế tổng RNA, bao gồm miRNA, từ vật liệu tế bào và có thể được sử dụng để làm sạch phản ứng RNA nói chung, với tùy chọn cô lập protein và DNA. Mẫu được ổn định sau khi ly giải mẫu ban đầu trong đệm NMiL, không có hoạt động của RNase. Có thể cần phá vỡ cơ học đối với các mẫu khó ly giải. Đệm ly giải NMiL có các muối biến tính và β-mercaptoethanol, hỗ trợ ly giải và ổn định mẫu. Các phần mẫu chưa ly giải được lọc ra, làm giảm độ nhớt của dịch ly giải. Đồng thời, DNA có trọng lượng phân tử cao bị cắt, chuẩn bị cho quá trình tiêu hóa DNase hiệu quả hơn. Việc bổ sung ethanol tạo ra các điều kiện liên kết tối ưu cho các đoạn RNA và DNA trên khoảng 200 nt vào Cột RNA NZYSpin (các vòng màu xanh lam). Trong khi đó, RNA và protein nhỏ hơn được thu thập trong dòng chảy. Sự phân tách này đảm bảo độ tinh khiết của RNA cao hơn, vì DNA và protein được loại bỏ riêng biệt và hiệu quả. Nếu muốn tinh chế toàn bộ axit nucleic, bao gồm cả DNA, thì quá trình tiêu hóa DNAse trên cột sẽ bị bỏ qua. Nếu không, một bước khử muối sẽ chuẩn bị Cột RNA NZYSpin cho quá trình tiêu hóa DNA trên cột. Trong khi đó, Đệm NMiPP được thêm vào dòng chảy để kết tủa protein, sau đó được loại bỏ thông qua quá trình lọc qua Cột loại bỏ protein NZYSpin (vòng trắng), chỉ để lại RNA nhỏ. Quá trình này được kết hợp với Đệm NMiB, điều chỉnh các điều kiện liên kết cho RNA nhỏ với Cột RNA NZYSpin (vòng xanh). Sau khi tiêu hóa DNA, hỗn hợp này được nạp vào Cột RNA NZYSpin (vòng xanh). Nếu muốn tách riêng các phần RNA nhỏ và lớn, thì hỗn hợp cũng có thể được liên kết với Cột RNA NZYSpin thứ hai mới (vòng xanh). Sau các bước rửa nghiêm ngặt, RNA tinh khiết được rửa giải trong 30 – 100 μL nước không chứa RNase và sẵn sàng cho cả các ứng dụng hạ lưu tiêu chuẩn và nâng cao.