Description

Bộ tổng hợp cDNA sợi đầu tiên NZY M-MuLV là một hệ thống bao gồm tất cả các thành phần cần thiết để tổng hợp cDNA sợi đầu tiên, ngoại trừ RNA khuôn mẫu. cDNA sợi đơn thu được phù hợp để sử dụng trong PCR phiên mã ngược định lượng thời gian thực (RT-qPCR). Bộ tổng hợp cDNA sợi đầu tiên NZY M-MuLV được xây dựng để cung cấp sản lượng cao các sản phẩm cDNA toàn phần và tăng độ nhạy trong RT-qPCR. Nguyên liệu đầu vào có thể dao động từ 10 pg đến 5 µg RNA tổng số. Bộ sản phẩm bao gồm sự kết hợp của các hexamer ngẫu nhiên và các đoạn mồi oligo(dT) ₁₈ để tăng độ nhạy. Các đoạn mồi được bao gồm trong NZYRT 2× Master Mix, cũng chứa dNTP, MgCl2 _và một đệm RT được tối ưu hóa. Hỗn hợp enzyme RT NZYM-MuLV bao gồm cả NZY M-MuLV Reverse Transcriptase (RNase H minus) và NZY Ribonuclease Inhibitor để bảo vệ RNA khỏi sự phân hủy do nhiễm ribonuclease. RNase H (từ E. coli ) được cung cấp trong một ống riêng biệt để phân hủy cụ thể khuôn mẫu RNA trong các lai cDNA-RNA sau khi tổng hợp cDNA sợi đầu tiên. Quy trình này sẽ cải thiện độ nhạy của phản ứng RT-qPCR tiếp theo vì các đoạn mồi PCR sẽ liên kết dễ dàng hơn với cDNA.