Description

Bộ tổng hợp cDNA sợi đầu tiên NZY M-MuLV, oligo riêng biệt, là một hệ thống bao gồm tất cả các thành phần cần thiết để tổng hợp cDNA sợi đầu tiên, ngoại trừ RNA khuôn mẫu. Các hexamer ngẫu nhiên và các đoạn mồi Oligo(dT) ₁₈ được cung cấp trong các ống riêng biệt để thuận tiện cho việc lựa chọn đoạn mồi thích hợp để bắt đầu phản ứng phiên mã ngược của bạn. cDNA sợi đơn thu được phù hợp để sử dụng trong PCR phiên mã ngược định lượng thời gian thực (RT-qPCR). Bộ tổng hợp cDNA sợi đầu tiên NZY M-MuLV, oligo riêng biệt, được bào chế để cung cấp sản lượng cao các sản phẩm cDNA toàn phần và tăng độ nhạy trong RT-qPCR. Nguyên liệu đầu vào có thể dao động từ 10 pg đến 5 µg RNA tổng số. Bên cạnh các hexamer ngẫu nhiên và các đoạn mồi Oligo(dT) ₁₈ , bộ sản phẩm bao gồm NZYRT 2× Master Mix, không có oligo, chứa dNTP, MgCl2 _và đệm RT được tối ưu hóa; Đệm ủ 10× và hỗn hợp enzyme RT NZYM-MuLV. Hỗn hợp enzyme RT NZYM-MuLV bao gồm cả NZY M-MuLV Reverse Transcriptase (RNase H minus) và chất ức chế NZY Ribonuclease để bảo vệ RNA khỏi sự phân hủy do nhiễm ribonuclease. RNase H (từ E. coli ) được cung cấp trong một ống riêng để phân hủy cụ thể khuôn mẫu RNA trong các lai cDNA-RNA sau khi tổng hợp cDNA sợi đầu tiên. Quy trình này sẽ cải thiện độ nhạy của các phản ứng RT-qPCR tiếp theo vì các đoạn mồi PCR sẽ liên kết dễ dàng hơn với cDNA.